蛋白分析FAQ彙總
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質譜可以敏感的定量報告混合物的生物分子組分的質量。如果兩個生物分子具有不同的質量,那麼即使它們共同洗脫,它們也會被分解相關服務:蛋白質質譜鑑定
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• 在鑑定或定量複雜生物樣品的給定成分方面,樣品離子掃描如何優於蛋白質混合物的單四極分析?
在產品離子掃描中,可以在一級質譜中篩選混合物中感興趣成分的質量,在二級質譜中對其進行碎片化,然後在三級質譜中掃描碎片的質荷比資訊。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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不是的,陽離子交換樹脂在表面上具有陰離子(強酸)基團,如R-SO3-。因此,它將結合淨陽離子或表面至少有一些正電荷的蛋白質。它不會結合純陰離子蛋白質。它不會與pI高於緩衝液pH=7.5的蛋白質結合。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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蛋白質外圍的陽離子(賴氨酸和精氨酸)基團與樹脂上的磺酸鹽之間的靜電吸引。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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可能是多價的。蛋白質表面的賴氨酸基團越多,結合點越多,結合越強。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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• 為什麼增加NaCl等會降低蛋白與陽離子交換樹脂的結合強度?
增加離子強度有利於洗脫蛋白質,Na+ 在溶液中與賴氨酸殘基競爭磺酸鹽,從而使蛋白與樹脂的結合能力減弱。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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基於疏水性、溶液中非極性成分粘附或分配到色譜固定相上的油性塗層中的趨勢來分離不同的蛋白組分。相關服務:蛋白質純度分析(分子篩/反相色譜)
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• 離子強度是否會對在100%水性緩衝液中進行的反相色譜分離產生主要影響?
與蛋白質(溶質/分析物)本身的疏水/親水性質相比,離子強度將僅略微改變反相系統中的保留特性。相關服務:蛋白質純度分析(分子篩/反相色譜)
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• 不同時期用Label free分析的多組蛋白質樣品可否一起進行統計分析?
只要適當地規範化資料可以一同進行統計分析。大多數最新的蛋白質組學搜尋工具(例如,MaxQuant,Fragpipe,適當地規範化資料,您的統計測試將是有效的。大多數最新的蛋白質組學搜尋工具(例如,MaxQuant,Fragpipe,ProteomeDiscoverer)將校正質量和保留時間漂
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• 對多組織提取的蛋白質進行WB時,條帶不均衡歸一化是什麼原因?
可能是由於移液錯誤,或者蛋白質從凝膠孔中浸出。相關服務:蛋白質免疫印跡和電轉移服務
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