蛋白分析FAQ彙總
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對於考馬斯染色,沒有額外要求。對於銀染,必須使用與質譜相容的程式。可以使用與質譜相容的銀染色試劑盒(如Amersham International:Plus One染色試劑盒)。Sypro ruby與質譜分析相容,但需要合併譜帶。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
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要看情況,一般考馬斯染色的斑點和條帶即使放置幾個月也可以分析。銀染斑點和條帶可在數週前進行分析,但超過1-2個月的銀染凝膠可能不會產生令人滿意的結果。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
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可以,前提是樣品是純的,並且在低鹽緩衝液中,例如50mM碳酸氫銨;對於TRIS或磷酸鹽緩衝液,最大鹽強度為20mM。NaCl和表面活性劑(例如SDS)不能存在。裝運前,樣品必須在微型離心管中冷凍乾燥或凍幹。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
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不可以,樣品必須是凝膠帶或凍幹。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
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免疫沉澱製備溶液不能直接分析,因為抗體的存在淹沒了來自目標蛋白的訊號,因此需要先進行1D SDS-PAGE凝膠分離。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
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所有標準分析都使用胰蛋白酶消化,因為它是蛋白質組學中最有效的酶。但是如果有需要,可以使用其他酶,如糜蛋白酶和穀氨酸酶等。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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不可以。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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蛋白質質譜鑑定不需要進行半胱氨酸的還原和烷基化。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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對於低質量(<20kD)的蛋白質,可能難以獲得較高的蛋白質鑑定結果。在這種情況下,可以提高樣品的量。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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MSPnr100資料庫是在澳大利亞建立的一個高度管理的資料庫,包括Swiss-Prot。使用MSPnr100的優點是它包含了更多的蛋白質序列並且冗餘序列的範圍被去除,因此獲得的命中率通常更高。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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