蛋白分析FAQ彙總
-
純度、樣品可能修飾情況、製備方法、驗證目的以及表觀分子量。相關服務:基於Edman降解的蛋白N端序列分析
-
對於溶劑的要求:不可含有氨鹽、Tris等、 1 級或2級胺的鹽溶液以及SDS。相關服務:基於Edman降解的蛋白N端序列分析
-
1、樣品量:5-8 條泳道,每條泳道的樣品儘量用最高濃度樣品,上最大體積(儘量使條帶長胖為正常的 2-3 倍寬度);2、硝酸纖維素膜:具有耐藥性,不能使用;3、在電轉印中使用的緩衝液儘可能不含甘氨酸;4、染色劑推薦使用考馬斯亮藍。相關服務:基於Edman降解的蛋白N端序列分析
-
也許是因為溫度控制不好、流動相發生變化以及柱子未平衡好。相關服務:蛋白質純度分析(分子篩/反相色譜)
-
1、流速發生變化-重新設定流速,使之保持穩定;2、泵中有氣泡-透過排氣等操作將氣泡趕出;3、流動相不合適-改換流動相或使流動相在控制室內進行適當混合。相關服務:蛋白質純度分析(分子篩/反相色譜)
-
1、篩板堵塞或柱失效-反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子;2、存在干擾峰-改換流動相或更換選擇性好的柱子;3、柱超載-減少進樣量。相關服務:蛋白質純度分析(分子篩/反相色譜)
-
導致靈敏度不夠的原因較多:1、樣品量不足;2、樣品未從柱子中流出;3、樣品與檢測器不匹配;4、檢測器衰減太多;5、檢測器時間常數太大;6、檢測器池窗汙染;7、檢測池中有氣泡;8、記錄儀測壓範圍不當。;9、流動相流量不合適;10、檢測器與記錄儀超出校正曲線。相關服務:蛋白質純度分析(分子篩/反
-
• 我需要培養/收穫多少個細胞才能獲得足夠的蛋白質用於質譜分析?
這實際上取決於您的目標蛋白質的豐富程度。一般來說,您需要使用比用於蛋白質印跡更多的裂解物進行質譜分析。一個合理的起點可能至少是您用於蛋白質印跡的量的 10 倍,但可能需要進一步擴大量才能看到目標蛋白質。相關服務:蛋白質質譜鑑定
-
• 如果我在凝膠上看到一條漂亮的條帶,我可以預期只從蛋白鑑定中看到一種蛋白質,對吧?
不。我們幾乎總是能夠在 IP 實驗中從凝膠上切下的每個條帶中鑑定出幾種蛋白質。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
-
• 如果我在列表中看到一個有趣的蛋白質,這意味著它確實存在於我的樣本中,對嗎?
不。實際上這意味著蛋白質可能存在,列表中“較高”的蛋白質更有可能存在,而較低的蛋白質不太可能存在,主要取決於總分和匹配的肽的分數。分數高於 200 的蛋白質幾乎可以肯定是“真實的”,但隨著分數的下降,假陽性的可能性會增加。我們通常會審查您感興趣的較弱的命中,以嘗試對假陽性風險進行分層。弱匹配
How to order?