蛋白分析FAQ彙總

• • 在典型的蛋白質鑑定中序列覆蓋率是多少？

  通常，每個蛋白質的序列覆蓋率在 10% 到 90% 之間，這取決於蛋白質丰度和蛋白質性質。相關服務:蛋白質質譜鑑定

• • 獲得不良質譜資料的最常見原因是什麼？

  原因包括：1. 使用與質譜檢測不相容的染色方法；2. 樣品中存在離子抑制試劑，如聚合物、去汙劑和甘油；3. 汙染蛋白過多，如親和純化中的抗體，血清樣品中的高丰度蛋白；4. 蛋白質特性；例如，有大量修飾的蛋白質，特定蛋白質中的賴氨酸和精氨酸殘基很少。相關服務:蛋白質質譜鑑定

• • 如何避免角蛋白汙染？

  角蛋白是最常見的蛋白質汙染物，主要來自人體面板和頭髮，有時也來自羊毛衫等衣服。以下是避免樣品角蛋白汙染的提示：1. 在表面乾淨的乾淨實驗室工作；2. 使用密閉盒中的移液器吸頭和微量離心管；3、使用前用乾淨水沖洗裝置（瓶子、玻璃板、電泳裝置、染色盤）；4. 在樣品製備和水解過程中始終戴手套。切

• • de novo 結果中的 TLC 和 ALC 分數是什麼意思？

  區域性置信度是特定氨基酸存在於從頭肽中特定位置的置信度，它以百分比表示。總區域性置信度(Total Local Confidence，TLC)是肽序列中每個氨基酸的區域性置信度得分(0到1)的總和。平均區域性置信度(Average Local Confidence，ALC)是 TLC 的平均

• • 良好的從頭測序結果如何截止？

  通常你會發現好的肽段在 55% 及以上。這並不意味著整個序列都是正確的序列。這是因為在從頭測序時，由於這些碎片產生的離子質量高/質量低，所以更難解析譜的起點和終點。這就是我們在結果中新增顏色編碼的原因，這樣您就可以看到序列中的哪個位置具有更高的置信度。相關服務:從頭測序

• • 為什麼我不能進行無標籤定量？

  最可能的原因是使用者必須至少有兩個樣本並且每個樣本中的片段數量相同。相關服務:定量蛋白組分析

• • 對於未知蛋白質，如果蛋白質的N端環化或N端有未知修飾，如何準確分析蛋白質序列？

  對於序列未知的蛋白質，尤其是工程重組蛋白質、體外合成蛋白質、工程抗體，或基因序列尚未研究過的蛋白質，其資訊往往不包含在蛋白質資料庫中。爲了實現對此類蛋白質序列的準確分析，必須使用蛋白質從頭測序。蛋白質從頭測序是一種基於質譜的分析方法。與傳統的質譜方法類似，從頭測序法也是先將蛋白質切成小的多肽

• • 哪種型別的GC檢測器最常用?

  FID是氣相色譜中最常用的檢測器。FID對含有碳原子(C)的化合物敏感，並且能夠檢測到，而碳原子幾乎存在於所有有機化合物中。相關服務:蛋白質質譜鑑定

• • 氣相色譜法的準確度如何？

  如果使用得當，氣相色譜是非常準確的，可以測量1ml液體樣品中物質的皮摩爾，或氣體樣品中十億分之一的濃度。相關服務:蛋白質質譜鑑定

• • 什麼是ESI質譜?

  電噴霧電離（ESI）是一種在質譜分析中使用電噴霧產生離子的技術，在電噴霧中對液體施加高壓產生氣溶膠。它在從大分子中產生離子時特別有用，因為它克服了這些分子在電離時分裂的傾向。相關服務:蛋白質質譜鑑定