蛋白分析FAQ彙總
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較小的蛋白質被保留的較少，因此移動得更快。SDS不僅為蛋白質提供強的負電荷，而且還使蛋白質變性，從而使每個蛋白質大致呈球形，消除了會影響電泳遷移率的蛋白質形狀差異。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離
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由於孔徑的差異，每個尺寸排阻柱都有一個可以分離的分子量範圍。在SEC中，排阻極限是色譜柱工作範圍上限處的分子量，超過該值，分子就會因太大而無法被困在固定相中，並將在色譜柱的空隙中被洗脫。許多SEC填料都是由其排阻極限所指代的。 同時，工作範圍的下限被定義為滲透極限，即小到足以穿透固定相的所有
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尺寸排阻色譜（SEC），又稱凝膠過濾色譜或分子篩色譜，是一種根據分子大小分離分子的色譜方法，廣泛用於蛋白質純化和聚合物表徵。 多孔基質在SEC中被用作固定相，由於空間位阻的原因，被分析物具有不同的通道。大分子被基質排阻因此將被首先洗脫，而被孔隙捕獲的小分子將有更長的通路因此稍後被洗脫。分析物
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在選擇用於蛋白質分析的 SEC 色譜柱時，需要考慮許多引數。解析度是最重要的引數之一，它受到幾個因素的影響，包括： 樹脂效能，如樹脂化學成分、顆粒（珠）尺寸和尺寸分佈、孔徑和選擇性，以及分餾範圍； 色譜柱相關因素，如色譜柱長度和色譜柱填料效率； 執行條件，如樣品體積和進樣技術、緩衝液成分和流
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尺寸排阻柱床有三個功能組成分：孔隙體積，空隙體積和基質體積（床體積）。孔隙體積是指顆粒內的孔-腔空間。空隙體積是指排阻的體積，即顆粒之間的空間。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）
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對稱的洗脫峰表明填料的均勻性。柱的內部體積（Vi）可以透過從具有K d-1.0的小分子如葡萄糖或酪氨酸的洗脫體積中減去空隙體積來確定。柱的總體積（Vt）是空隙體積和內部體積的總和。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）
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空隙體積特指柱內所含流動相的體積。同一術語有時也非正式地用於指柱/管或配件中空腔的體積。空隙體積也被稱為死體積。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）
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選擇具有提供所需解析度的床高的色譜柱。製備分離建議床高在30至100釐米之間。選擇適合需要處理的樣品體積的色譜柱尺寸。選擇保持解析度和最小化分離時間的最高流速。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）
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（色譜中）上樣後必須透過色譜柱的流動相的體積，以在流出物或洗脫液中產生特定溶質濃度的峰。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）
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將未保留化合物的洗脫時間乘以流速，得到系統和色譜柱的實際空隙體積。要單獨確定柱空隙體積，您需要減去在沒有連線柱的情況下確定的系統空隙體積。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）
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