離子交換色譜—如何選擇IEX的緩衝液?
緩衝離子應具有與IEX介質上的官能團相同的電荷。對於陰離子交換,選擇高於等電點(pI)0.5-1個pH單位的緩衝液,因為隨著pI的增加,蛋白質會結合得更緊密。對於陽離子交換,選擇低於pI0.5-1個pH單位的緩衝液,因為隨著pI的降低,蛋白質會結合得更緊密。 若同時進行陰離子和陽離子交換,則需要考慮蛋白質的穩定性,因為當pH接近蛋白質的等電點(pI)時,許多蛋白質是不穩定的。
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