氨基酸分析儀是如何工作的？

氨基酸分析是一種基於離子交換液相色譜的技術，有廣泛的應用領域，以提供定性和定量的成分分析。 操作的基本原理是由Spackman，Moore和Stein於1958年開發的連續流動色譜程式。目前，這一基本原理已經過改進，可以進行全自動、高速、靈敏的分析。有時，這被稱為經典氨基酸分析。 將含有氨基酸混合物的樣品載入到陽離子交換樹脂柱上。然後將具有不同pH值和離子強度的緩衝液泵入色譜柱以分離各種氨基酸。色譜柱溫度得到精確控制，並可根據需要進行改變，以產生所需的分離。將柱洗脫液與茚三酮試劑混合，該混合物透過高溫反應線圈。在反應線圈中，茚三酮與洗脫液中的氨基酸反應形成有色化合物。產生的有色化合物的量與洗脫液中存在的氨基酸的量成正比。 從反應線圈中，洗脫液/茚三酮混合物被送入光度計單元，在此透過測量吸收的光量來確定每種有色化合物的量。光吸收是在兩個波長（570nm和440nm）下測量的，因為氨基酸產生的有色化合物吸收波長為440nm或570nm的光。 光度計輸出連線到雙通道圖表記錄儀，該記錄儀將氨基酸濃度繪製為一系列峰，或連線到適當的積分系統。圖表上峰的保留時間確定了氨基酸，峰下的面積表示存在的氨基酸的量。由於氨基酸分析儀是一種比較儀器，因此在開始一系列分析之前必須進行校準分析，以產生用於比較的標準跡線。




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