蛋白純化——我感興趣的蛋白質在純化過程中“消失”了,我該怎麼辦?
這種情況可能是由於:1、蛋白質已被蛋白酶降解——向樣品和緩衝液中新增蛋白酶抑制劑以防止蛋白水解消化;或透過 Benzamidine Sepharose 4 Fast Flow 等介質執行樣品以去除胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶。2、樣品製備過程中蛋白質吸附至過濾器——使用不同膜型別的過濾器。 再生纖維素、PVDF 和 PES 通常表現出低蛋白質結合,也是確定最適合的膜型別的良好選擇。
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