使用離子交換色譜時，如何最大限度地提高目標分子和雜質之間的分離度？

在離子交換色譜中有許多方法可以實現更好的分離，這些方法也可以應用於其他色譜模式。首先，可以透過增加柱床高度來最大化解析度。典型的柱床高度範圍為15cm-30cm。如果降低線速度，則30cm以上的柱床高度都將導致背壓升高而通量降低。柱床高度升高的好處是可以在相同流速下增加樣品在色譜柱中的停留時間，從而提高結合能力。其次，可以使用梯度代替階梯洗脫來分離雜質。根據雜質與目標分子的結合緊密程度可以調整梯度的斜率進而調整電導率的急劇或緩慢變化。需要注意的是，較淺的梯度會產生較寬的洗脫峰。最後，可以調整pH值以影響分子結合的緊密程度並隨後從柱中洗脫。pH值的微小變化可能會導致洗脫峰的保留時間發生偏移，並可能實現更好的分離。此外，如果目標分子的pKa與雜質有很大不同，將pH值調整為高於或低於目標分子的pKa，則陰離子或陽離子交換可能是合適的。

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