DDA蛋白質組學、DIA蛋白質組學與靶向蛋白質組學在資料獲取方式上有何差異,他們的優點和侷限性分別是什麼?

    DDA-資料依賴性採集:經典鳥槍蛋白質組學。質譜儀選擇MS1中最高強度的離子進行MS2電離。優點:無偏倚的蛋白質檢測。無需事先假設。缺點:由於不同的肽段在不同的執行中檢測到,所分析的蛋白質重複性低,批次效應大。同樣導致許多資料丟失。在確定檢測樣本中含量最高的蛋白質時誤差較大,尤其是對蛋白質濃度動態範圍波動很大的血漿樣品來說。DIA-資料獨立採集:“滑動視窗”選取一定質荷比範圍的MS1離子進行後續的MS2分析,從而實現所有離子的掃描分析。優點:無偏倚的蛋白質檢測。無需事先假設。可檢測大量蛋白質。缺點:獲取的資料太多導致分析資料的速度下降。由於收集了太多的資料,需要進行復雜的資料分析來獲取單個肽的強度,通常使用肽段資料庫來實現這一目的。靶向MS:對目標肽進行任意型別的質譜分析,實際上通常是SRM或PRM,可能具有穩定同位素標準(SIS)。優點:批次效應較少。SIS可實現更好的量化,甚至絕對量化。重複性好,資料缺失少。缺點:需要開發靶向分析。在實驗之前,需確定要分析哪些蛋白質。SIS價格昂貴。


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