免疫印跡有哪些檢測方法?

    蛋白質印跡檢測有三種不同的方法:化學發光法、化學熒光法和熒光法。化學發光是較常用的檢測方法,透過酶(如辣根過氧化物酶HRP)和化學發光分子(如魯米諾)之間發生的化學反應發光,這種發光可以用CCD成像儀檢測。化學熒光是一種結合熒光和化學發光的分子生物學和生物化學的替代標記和檢測方法。化學發光基於酶反應產生光,而化學熒光將熒光分子附著在二級或三級抗體上,透過光源激發。熒光法涉及使用與熒光分子(熒光團)結合的二級抗體。熒光團被光源激發時會釋放光子,當被激發的分子返回到正常狀態就會以光的形式被檢測到。熒光團發出的光是連續的,並且與膜上的蛋白含量成正比。使用熒光法的優點之一是能夠同時檢測同一個印跡上的多個目標蛋白,從而能夠檢測同一印跡上正常化和感興趣的蛋白質。


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