為什麼要將蛋白質消化成肽進行液相色譜-質譜分析,而不是直接分析蛋白質?
雖然質譜儀可以測量完整蛋白質的質量,但在蛋白質組學中分析肽而不是蛋白質的原因有很多:1、蛋白質可能難以處理,並且在相同的條件下可能並不都是可溶的。2、此外,質譜儀對蛋白質的靈敏度遠低於對肽的靈敏度,並且蛋白質可能被處理和修飾,使得組合效應使得無法確定許多所得同種型的質量。此外,從序列中預測成熟,正確修飾的蛋白質的質量並不容易,或者相反,哪種蛋白質可能產生了測量的蛋白質質量。最重要的是,如果目的是鑑定蛋白質,則需要序列資訊,並且質譜儀最有效地從長達約20個殘基的肽中獲取序列資訊,而不是從整個蛋白質中獲取序列資訊。然而,使用非常專業的裝置,從完整的蛋白質中獲取部分序列資訊成為可能,然後可以將其用於鑑定目的或以稱為“自上而下”蛋白質測序的方法分析蛋白質修飾。
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