到目前為止,還沒有為質譜工作跑 SDS-PAGE。跑凝膠時應該採取哪些預防措施以獲得最佳結果?

    我們的建議有以下幾個方面; a) 清潔整個凝膠執行裝置,在所有步驟中使用新手套,並在整個過程中保持表面清潔!!! b) 使用新鮮製備的緩衝液,染色劑不要重複使用。 c) 將樣品加到凝膠上時,樣品要與任何其他對照(如全細胞裂解物等,如果有的話)隔離,以避免交叉汙染。最好在單獨的凝膠中跑樣品,與對照有足夠的間隙(2-3 個泳道)。如果您希望所有樣品跑一塊凝膠,請在樣品和對照之間保持 2-3 個泳道的間隙。永遠不要讓泳道空著,而是加相似體積的上樣緩衝液。這將有助於精細的流線型樣品帶。 d) 您須記錄總蛋白上樣量(向我們提供資訊) e) 染色凝膠並拍攝影象。(向我們提供資訊) f) 僅在成像後剪條帶。使用新的無菌一次性刀片在層流罩中的乾淨表面上切割必要的條帶。 g) 將條帶懸浮在質譜級水中放於乾淨ep管中提供給我們。


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