如何最佳化我的 IP 以獲得更好的鑑定結果?
您可以執行試用 IP 並透過 WB 對其進行監控。一個目標是儘可能多地拉下目標蛋白,這可以透過對上清液進行 WB 來評估。然後,儘可能多地從珠子上洗脫,再次由 WB 確定,最後一步可以使用熱 SDS-PAGE 上樣緩衝液從珠子上進行多次洗脫。最後按比例放大並嘗試銀或膠體考馬斯染色凝膠。希望您也有一個具有代表性的對照來進行比較以檢測特定的粘合劑(假設您正在研究一個複合物)。這種凝膠應該讓您瞭解目標蛋白的數量,以及“其他”需要或不需要的蛋白質。
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