如何從凝膠中切出蛋白質條帶?
從凝膠中切出蛋白質條帶時應格外小心!首先,採取一切預防措施避免凝膠與裸手或任何潛在的髒表面直接接觸,例如燈箱、刀片或用過的容器。您可能需要戴上乾淨的手套,將凝膠放在乾淨的塑膠薄膜(例如 Sara Wrap)上,然後將其放在燈箱上,使用乾淨的刀片和凝膠容器。請記住,即使是一小塊人體面板也可能含有比凝膠條帶中的蛋白質多一百倍的角蛋白。其次,要切出的凝膠片的大小應接近該蛋白質條帶的大小。凝膠尺寸過小意味著珍貴樣品的損失,而凝膠尺寸過大可能會降低膠內消化肽的產量。蛋白條帶被切除後,小心地將其轉移到乾淨的 500 μl Ep管中。蓋上管子,貼上標籤;並用封口膜包裹它以防止凝膠片乾燥(您也可以新增約10 μl 的1% 乙酸/水以防止其乾燥)。如果您需要切幾條帶,請一條一條地剪下來,以免這些凝膠條帶被錯誤標記。這樣的錯誤將很難追查。
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