如何製備nanoLC-MS/MS分析的蛋白樣品？

凝膠樣品—短1D PAGE：將蛋白質樣品載入到1D PAGE凝膠上，僅電泳1釐米（200 V時5-8分鐘）。用考馬斯染色後，將整個染色區域切除為一個樣品（2x5mm凝膠片）並將其送去分析。長1D PAGE：將蛋白質樣品載入到 1D PAGE 凝膠上，然後照常電泳。用考馬斯染色後，將整個染色區域切成5-10個較小的塊（2x5mm大小）。將每件產品放入單獨的管中，並寄出進行分析。2D PAGE：將蛋白質樣品載入到2D PAGE凝膠上並像往常一樣電泳。用考馬斯染色後，切除具有多個斑點的選定區域。將每個斑點（2x5mm）放入單獨的管中並運送以進行分析。注意：將所有凝膠樣品切成2x5mm的碎片。溶液樣品—最小樣品量：5-50微克。避免使用洗滌劑、DMSO、甘油和其他非揮發性溶劑。將緩衝液濃度保持在最低限度，因為高鹽會干擾MS中的電離，LC-ESI MS可能適用於含有少量鹽或尿素的樣品。但是，在沒有洗滌劑的揮發性溶劑中，緩衝強度低，可以獲得最佳結果。




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