HPLC—為什麼在正相色譜中難以獲得可重複的保留時間？

正相高效液相色譜中保留時間變化的原因是保留時間與極性高的流動相組分（尤其是水）的含量密切相關。即使在流動相中沒有新增水，或在極性很低的溶劑中，也會溶解少量的水。此外，裸露的二氧化矽極易吸溼，因此水會吸附在表面上。因此，正相系統中的水含量可以顯著變化，很少受到控制。當使用半飽和流動相時，可獲得最佳結果，例如可重複的保留時間。獲得半飽和流動相的直接方法是將流動相分成等份。向一份（例如500 mL）中加入2-3 mL水並使混合物攪拌約30分鐘。然後除去多餘的水（分離漏斗），將乾燥部分（500mL）加入飽和部分。即使半飽和流動相也會在很大程度上縮短柱達到平衡的時間。正相柱的平衡，尤其是在處理裸矽時，仍然需要數小時。此外，極性改性劑固定相，如氰基或二醇，通常不太容易發生流動相含水量變化，並且可以更快地平衡。

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