為什麼選擇差異凝膠電泳2D-DIGE進行定量蛋白質組學分析,而不是2D凝膠?

    在2D-DIGE(two-dimensional difference gel electrophoresis差異凝膠電泳)中,我們使用熒光染料對蛋白質進行標記,從而能夠在一張凝膠中進行3個樣品的測定。與傳統的2D凝膠相比,2D-DIGE有許多優勢: 更高的靈敏度:熒光染料的靈敏度為0.2ng/spot,而考馬斯的靈敏度為100ng/spot,而銀染色的靈敏度為1ng/spot。 更高的準確度:極高的點解析度可實現準確的點定量。可檢測到小至10%的蛋白質表達差異 更高的重現性:在同一凝膠上或跨不同凝膠上用不同Cydye標記的同一樣品上獲得幾乎相同的資料,從而消除了執行技術重複的需要。 更廣的光譜:每張凝膠可以分辨約5000個蛋白質點,允許對低丰度蛋白質、大蛋白質和小肽進行寬動態範圍的檢測/定量。 使用更少的膠條:每塊凝膠最多可容納3個不同的樣品。


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