SILAC蛋白組
SILAC蛋白組或SILAC定量蛋白組學,是指利用SILAC技術對蛋白質組進行定量研究。百泰派克生物科技提供基於SILAC標記的定量蛋白組分析服務。
SILAC
在基於質譜(MS)的定量蛋白質組學中,SILAC(Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture)是透過在細胞培養過程中加入穩定同位素標記的氨基酸對樣品進行標記後結合質譜檢測,對樣品進行蛋白質組學分析的方式是一種簡單、可靠而又強大的方法。SILAC透過正常代謝過程對細胞蛋白進行標記,在新合成的蛋白質中加入非放射性的、穩定的含同位素的氨基酸。SILAC提供了準確的相對定量,不需要任何化學衍生或操作,即可實現蛋白質組學分析。SILAC屬於體內標記技術,使樣品更接近自然狀態,其標記效率高達100%,且標記效果穩定,適合於全細胞蛋白分析,以及膜蛋白的鑑定和定量,每個樣本只需要幾十微克的蛋白量。
SILAC蛋白組分析
SILAC定量蛋白組分析的實驗流程是:在細胞培養基中加入輕、中或重型穩定同位素標記的必需氨基酸賴氨酸(Lys)和精氨酸(Arg),在細胞生長過程中,新合成的蛋白質帶上穩定同位素標籤。培養一段時間後,等量混合細胞培養物中各型別蛋白質,酶解後進行質譜分析。由於質量差異,可以在質譜儀中區分帶有不同穩定同位素組成的化學性質相同的肽對。透過比較一級質譜圖中不帶標記和帶同位素標記的質譜峰型的面積大小即可進行相對定量,同時二級譜圖還可以對肽段進行序列測定從而進行蛋白鑑定。
SILAC蛋白組
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