SILAC與免疫共沉澱質譜聯用的蛋白互作分析

    免疫共沉澱(Co-Immunoprecipitation,CoIP)是一項基於抗體特異性識別特定抗原的這一原理研究蛋白質相互作用的經典方法。免疫共沉澱常用於檢驗生理狀態下蛋白質間的相互作用,透過與質譜(MS)聯用可以用於鑑定發現新的相互作用蛋白。百泰派克利用SILAC方法分別標記實驗組和對照組細胞後進行Co-IP實驗,依靠抗原與抗體之間的專一性反應分離得到免疫複合物;再透過LC-MS/MS來定性/定量檢測免疫複合物中的蛋白;當實驗組與對照組中某個蛋白質的含量達到統計學差異時,判定這個蛋白質與研究的蛋白具有相互作用,可極大降低蛋白質互作假陽性結果可能性。SILAC技術和Co-IP-MS技術結合可用於高通量定量分析在特定情況下蛋白的互作蛋白網。
    SILAC的聯用從源頭引入質量差異,降低了實驗系統誤差,定量資訊豐富,準確度高。百泰派克公司採用Thermo Fisher的Q Exactive HF質譜平臺,Orbitrap Fusion質譜平臺,Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,推出SILAC與免疫共沉澱質譜聯用的蛋白互作分析服務技術包裹(SILAC-based CoIP-MS),您只需要將您的實驗目的告訴我們並將您的細胞寄給我們,我們會負責專案後續所有事宜,包括細胞培養、細胞標記、蛋白提取、抗體IP、效率檢測、蛋白酶切、肽段分離、質譜分析、質譜原始資料分析、生物資訊學分析。

    SILAC-based CoIP-MS實驗流程

    SILAC-based CoIP-MS實驗流程

    SILAC-based CoIP-MS實驗流程


    BTP-SILAC-based CoIP-MS 技術特點和優勢

    • 儘量保留蛋白質結構和翻譯後修飾
    • 蛋白的相互作用是在自然狀態下進行的,可以避免人為的影響
    • 可以分離得到天然狀態的相互作用蛋白複合物
    • 高通量,可快速全面分析所有相互作用的蛋白質
    • 可與對照組對比辨別非特異結合蛋白,低假陽性
    • 能比對分析出各個互作蛋白的相對丰度

    SILAC-based CoIP-MS實驗專案樣品要求

    1.您只需使用乾冰將凍存細胞寄給我們即可,同時保證細胞具有可以傳代培養5次以上的能力;
    2.如果您需要自己標記細胞並完成細胞的刺激等處理過程,您只需要將標記完成並且經過處理的細胞樣品或者蛋白樣品乾冰寄給我們即可;對於每個樣品,需要保證至少含有300 ug蛋白總量。

    注意:樣品運輸請使用足量的乾冰運輸,並且儘量選用較快的郵遞方式,以降低運輸過程中樣品降解的可能性。

    中/英文專案報告

    在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:

    1. 實驗步驟(中英文)
    2. 相關的質譜引數(中英文)
    3. 鑑定的蛋白質的詳細資訊
    4. 質譜圖片
    5. 原始資料
    6. 生物資訊學分析

    SILAC-based CoIP-MS一站式服務

    您只需下單-寄送樣品
    百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-資料分析-專案報告
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