多肽合成之後到鑑定怎麼做呢?現已用生信的方法預測了某序列的功能,想後續驗證一下

    後續的驗證可以參考一下幾個方面:


    1.多肽鑑定

    • 質譜分析(Mass Spectrometry, MS):用於確定多肽的分子質量,確認合成的多肽與預期的一致。
    • 氨基酸序列分析:透過串聯質譜(MS/MS)分析多肽的氨基酸序列,確保序列正確無誤。
    • 液相色譜(HPLC):用於評估多肽的純度

    2.多肽功能驗證

    1)體外實驗:利用細胞培養進行功能性實驗,如細胞增殖、細胞凋亡、訊號通路啟用等實驗,以驗證多肽的生物活性。

    • 酶活性測試:如果多肽具有潛在的酶抑制或啟用作用,可以透過相應的底物轉化實驗來評估其活性。
    • 結合實驗:如果預測的功能涉及與其他蛋白或DNA/RNA的結合,可以透過免疫共沉澱、雙雜交、EMSA等實驗來驗證多肽與目標分子的結合能力。

    2)體內實驗(可選):如果多肽具有潛在的生物學活性,可以在動物模型中進一步驗證其功能。包括評估藥代動力學(如吸收、分佈、代謝、排洩)和藥效學(如劑量反應關係、療效、副作用)。


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