請問O糖基化WB抗體檢測的protocol？

O-糖基化Western Blot（WB）抗體檢測的基本步驟如下：

1.樣本準備：

收集並製備含有目標蛋白的細胞或組織樣本。使用適當的裂解緩衝液裂解樣本，然後透過離心去除不可溶物。

2.蛋白濃度測定：

使用BCA蛋白測定試劑盒或類似方法，測定樣本中的蛋白濃度。

3.SDS-PAGE電泳：

根據蛋白的分子量，選擇合適的聚丙烯醯胺凝膠濃度。載入等量蛋白到凝膠上，進行SDS-PAGE電泳分離。

4.轉膜：

使用溼轉或半乾轉的方法，將蛋白從凝膠轉移到聚偏氟乙烯（PVDF）或硝酸纖維素（NC）膜上。

5.封閉：

使用5%脫脂牛奶或BSA溶液封閉膜，以防止非特異性結合。

6.一抗孵育：

用含有O-糖基化特異性抗體的稀釋液（通常是TBST，含有0.1% Tween 20和1-5%脫脂牛奶或BSA）覆蓋膜，通常在4°C下過夜孵育。

7.清洗：

使用TBST清洗膜，以去除未結合的抗體。

8.二抗孵育：

使用與一抗物種相對應的HRP或其他標記的二抗孵育膜，通常在室溫下進行1-2小時。

9.再次清洗：

再次使用TBST清洗膜。

10.檢測：

使用化學發光底物進行訊號檢測，根據需要進行曝光和成像。

注意：這是一個通用的步驟概述，具體細節（如抗體稀釋比例、孵育時間等）需根據實驗具體情況進行調整。

百泰派克生物科技--生物製品表徵，多組學生物質譜檢測優質服務商

相關服務：

糖基化位點分析

提交需求

How to order?