如何提取面板脂質Cer FFA Chor

    以下是提取面板脂質的大致流程:


    1.樣品採集

    首先,從面板表面採集樣品。可以透過刮取、使用帶有溶劑的拭子或其他方法完成。如樣品為凍存的面板組織,需在低溫下切割成小塊以便於後續處理。


    2.均質化

    使用均質器(如珠磨機或超聲破碎機)在冷凍條件下對面板樣品進行均質化,確保脂質充分釋放。


    3.提取液配製

    通常使用的是雙相溶劑系統,比如甲醇/氯仿/水的混合溶劑。一個常用比例是甲醇:氯仿:水 = 2:1:0.8。


    4.提取

    • 將均質後的樣品與甲醇/氯仿/水混合溶劑充分混合。
    • 震盪混合樣品數小時或過夜,確保脂質的充分提取。
    • 離心分離,通常會形成兩層,脂質主要存在於氯仿相(下層)。

    5.收集脂質相

    小心地抽取下層的氯仿相,避免擾動上層。


    6.清洗

    可能需要對提取的脂質相進行一次或多次清洗以去除雜質。這可以透過加入甲醇和水,再次離心實現。


    7.濃縮

    使用旋轉蒸發器或氮吹儀在低溫下蒸發掉溶劑,得到粗提脂質。


    8.脂質的分離和純化

    使用薄層色譜(TLC)或液相色譜(HPLC)等技術根據脂質類別分離純化Cer, FFA, 和Chol。


    以上每一步驟的具體條件(如溶劑的種類和比例、離心速度和時間、色譜條件等)需要根據具體的樣品和目標脂質進行最佳化。此外,整個過程中需要注意防止樣品的汙染和脂質的氧化。


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