脂質代謝組學研究中怎麼提取細胞內的脂質

提取細胞內的脂質過程通常包括以下步驟：




1.細胞採集：

將培養的細胞透過洗滌和離心收集起來。




2.細胞裂解：

使用裂解緩衝液（如含有去垢劑的鹽溶液）破壞細胞膜，釋放細胞內容物。這一步驟確保了脂質的釋放。




3.脂質提取：

最常用的方法是所謂的Bligh和Dyer方法或Folch方法。這些方法通常涉及到有機溶劑（如氯仿、甲醇和水）的使用。

• Folch 方法：向裂解的樣品中加入氯仿和甲醇（比例為 2:1）。充分震盪混合，確保脂質被有效提取。
• Bligh 和 Dyer 方法：向樣品中加入甲醇、氯仿和水（比例為 2:2:1.8）。充分震盪混合。




4.離心分離：

經過適當的搖動和混合後，樣品被離心以分離成兩層，上層是水相（含有非脂質成分），下層是氯仿相（含有脂質）。




5.脂質收集：

小心地收集下層，這裏包含了提取的脂質。




6.溶劑蒸發：

使用氮氣吹乾或真空離心蒸發器去除溶劑，可以得到純淨的脂質樣品。




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