DIA怎麼做到交替採集?是先全掃描打一級圖譜,再將一級全掃描範圍分為若干視窗,最後迴圈對每個視窗所有離子進行選擇、碎裂和檢測嗎?
- 在每個質量視窗,採用較低的碰撞能量進行一級質譜採集,以保留未碎裂的離子。
- 然後增加碰撞能量,對同一視窗內的離子進行碎裂,並採集產生的碎片離子的二級質譜資訊。
是的,您對資料獨立採集(Data Independent Acquisition, DIA)的基本原理理解得很準確。DIA通常透過以下步驟實現高低碰撞能量的交替採集:
1.全掃描一級質譜圖:
首先進行一級質譜的全掃描,以獲得樣品中所有物質的m/z(質荷比)資訊。這一步不涉及碎片化,而是用於記錄樣品中存在的所有離子的質荷比。
2.劃分質量視窗:
然後將整個質量範圍劃分爲若干個視窗(例如每個視窗覆蓋一定的m/z範圍)。這些視窗通常是連續的,並覆蓋整個感興趣的質量範圍。
3.交替採集:
接下來,系統會迴圈地對每個質量視窗中的所有離子進行選擇、碎裂(透過碰撞誘導解離,CID)和檢測。
4.數據處理:
收集到的資料包括一級和二級質譜資訊,這些資訊可以用來鑑定和定量樣品中的化合物。
DIA的優勢在於它不依賴於特定離子的預先選擇,因此可以同時採集大量化合物的資訊,包括可能被忽略的或未知的化合物。這使得DIA非常適合複雜樣品的全面分析。然而,這種方法也需要複雜的數據處理和分析策略,以從大量的資料中提取有用資訊。
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