蛋白質打LC-MS的引數條件一般怎麼設定
- 柱子型別:C18反相色譜柱。柱長一般在15-25 cm,內徑2.1 mm,粒徑3-5 µm。
- 流動相:A相:水+0.1%甲酸或三氟乙酸。B相:乙腈+0.1%甲酸或三氟乙酸。
- 流速:通常為300 µL/min。
- 柱溫:通常設定在40°C。
- 梯度洗脫:從5% B相開始,逐漸增加到95% B相,時間範圍大約60分鐘。
- 進樣量:通常為10 µL。
- 離子源:ESI離子源。源溫度200°C,噴霧電壓3 kV。
- 分析模式:全掃描模式:m/z 400-1600。或MS/MS模式,碰撞能量根據肽段和蛋白質的特性調整。
- 質量範圍:通常覆蓋m/z 400至1600。
- 碰撞能量:如果進行MS/MS,通常設定在20-35 eV。
- 氣體流量:噴霧氣體流量為10-15 L/min。
- 檢測器:通常使用高靈敏度或高解析度模式。
蛋白質的液相色譜-質譜聯用(LC-MS)分析時,引數設定取決於樣品特性和分析目的。常見的引數設定如下,可以供您參考:
1.色譜條件:
2.質譜條件:
注意,這些引數的具體設定將根據所使用的儀器、樣品的性質、以及實驗的具體目標而有所不同。在實際操作中,可能需要根據實驗結果進行最佳化和調整。
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