MALDI-TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight) 質譜和 QE (Quadrupole-Orbitrap) 質譜是兩種不同的質譜技術,它們在蛋白質檢測中的前處理步驟有一些差異。MALDI-TOF的前處理更傾向於直接將樣品與基質混合並形成晶體,而QE質譜的前處理則更加側重於蛋白質或肽段的液相色譜分離和電離。
一、MALDI-TOF 質譜前處理:
1.樣品製備:
涉及將蛋白質樣品與基質混合。基質在這裏起到幫助蛋白質樣品吸收鐳射能量並實現解吸附/電離的作用。
2.斑點化:
混合物被塗布在MALDI板上形成斑點。
3.晶化:
讓基質和蛋白質共晶化是關鍵步驟,這對於實現高效的鐳射解吸附/電離至關重要。
二、QE 質譜前處理:
1.樣品製備:
通常涉及蛋白質消化,如用胰蛋白酶處理,產生肽段,這些肽段隨後用於質譜分析。
2.液相色譜分離:
肽段通常需要透過液相色譜(LC)進行分離,以減少樣品複雜性。
3.電噴霧電離:
QE質譜常用電噴霧電離(ESI)作為電離源,這需要將樣品以液態形式介入。