待測物中蛋白組學檢測流程

蛋白組學檢測流程通常包括以下幾個步驟：




1.樣本準備：

• 收集和準備待測樣本，如細胞、組織、血清、尿液等。
• 對樣本進行蛋白質提取，以將蛋白質從細胞或組織中釋放出來。
• 確定蛋白質的濃度，並將樣品製備成適當的體積和濃度，以便後續的實驗




2.蛋白質純化

使用適當的方法純化蛋白質，通常使用SDS-PAGE凝膠電泳、2D凝膠電泳、液相色譜（如HPLC）等。




3.蛋白質酶解：

將蛋白質酶解為肽段，通常使用酶如胰蛋白酶（trypsin）進行酶解。




4.肽段分離：

使用液相色譜技術（如反相高效液相色譜）將肽段進一步分離。




5.質譜分析：

• 使用液相色譜-質譜儀器（LC-MS/MS）對酶解產物（肽段）進行分析。
• 透過質譜分析鑑定肽段，確定它們的氨基酸序列。




6.資料分析：

• 處理和分析LC-MS/MS資料，使用生物資訊學工具鑑定和定量蛋白質。
• 對比不同樣本的蛋白質組成，發現差異表達的蛋白質。




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