sds-page濃度計算方法

在準備SDS-PAGE凝膠時，凝膠的濃度是指丙烯醯胺的總濃度，它決定了凝膠孔隙的大小，從而影響蛋白質的分離效果。濃度越高，孔隙越小，適合分離小分子量蛋白質；濃度越低，孔隙越大，適合分離大分子量蛋白質。




一、計算凝膠濃度的公式為：




$\text{凝膠總濃度 }$




通常交聯劑是指N,N'-亞甲基雙丙烯醯胺（Bis），它與丙烯醯胺以固定的比例混合，常見的有1:29（Bis:丙烯醯胺）。




假設你想製備一個12%的聚丙烯醯胺凝膠，如果你使用的是30%的丙烯醯胺溶液（含有丙烯醯胺和Bis的固定比例），那麼你需要計算的是如何從30%的母液中得到12%的工作濃度。




二、示例：




如果你想要製備10毫升的12% SDS-PAGE凝膠，使用的30% 丙烯醯胺/交聯劑溶液（比如29:1的比例），則需要：




1.30% 丙烯醯胺溶液：

（所需的凝膠濃度/母液的丙烯醯胺濃度）×總體積

$=4mL$




2.去離子水（用於將總體積補充到10 mL）：

總體積 - 丙烯醯胺溶液的體積 - 其他組分的體積

10ml−4ml−其他組分的體積




3.其他組分（Tris緩衝液、SDS、APS、TEMED）根據配方加入固定體積。

如果有其他組分，比如Tris-HCl、SDS、TEMED和APS的體積分別為3.75 mL、0.1 mL、0.05 mL和0.1 mL，則去離子水的體積應該為：

$10mL-4mL-3.75mL-0.1mL-0.05mL-0.1mL=2mL$




因此，你將需要加入2 mL的去離子水。




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