有個糖,分子量一萬左右,想用Qtof做定性定量實驗,之前用C18酸體系,沒找到峰
在使用QTOF(四極杆-飛行時間)質譜進行定性定量分析時,如果使用C18酸性條件未能檢測到目標糖分子的峰,可能是由於糖分子的特性和實驗條件不匹配。糖類分子通常具有極性和疏水性較差的特點,這意味著它們在C18(疏水性)柱上的保留會很差,尤其是在酸性條件下,糖類往往不易離子化,因此難以被質譜檢測。
解決方案和步驟:
1.柱的選擇:
考慮使用更適合糖類分析的色譜柱,如疏水相互作用液相色譜(HILIC)柱。HILIC柱能更好地保留極性分子,對糖的分離效果更佳。
2.移動相最佳化:
使用含有適量乙腈的移動相,可以增強糖在HILIC柱上的保留和分離。同時,移動相中可以加入一定濃度的氨溶液或其他弱鹼,幫助糖類的離子化。
3.離子化模式:
糖類分子一般更適合用負離子模式檢測,您可以嘗試調整ESI源的引數,最佳化為負離子模式。
4.標準品:
如果可行,獲取與您的糖分子結構類似的標準品,進行方法的開發和驗證,這可以作為一個有力的對照實驗。
5.預處理步驟:
考慮樣品的潔淨度和複雜性,可能需要一個樣品淨化步驟來減少基質效應和提高檢測的靈敏度。
6.質譜引數:
最佳化質譜的引數設定,如碰撞能量、掃描速度等,來提高對糖分子的檢測靈敏度。
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