測膽鹽培養基中膽汁酸的含量,菌液怎麼前處理?
在測定膽鹽培養基中膽汁酸的含量時,菌液的前處理通常包括以下幾個步驟,以去除背景噪音並準確測量膽汁酸:
1.收集菌液樣本:
使用無菌技術從培養基中收集菌液。
2.離心分離:
使用高速離心機將菌體與菌液進行分離。通常需要在約4°C下,以高速(比如8000-10000 rpm)離心5-10分鐘。
3.濾過處理:
使用0.22 µm或更小的濾膜將離心後的上清液進行濾過,去除任何殘餘的微生物和雜質。
4.萃取膽汁酸:
使用適當的有機溶劑(例如乙醚、氯仿或甲醇)對溶液進行液-液萃取或固相萃取。
5.濃縮樣品:
如果需要,透過旋轉蒸發或其他方法對樣品進行濃縮。
6.重懸液與pH調整:
將處理後的樣品重懸於適當的緩衝液中,並調整pH至適合後續分析的水平。
7.儲存或直接分析:
根據分析方法的需要,可以將樣品儲存在低溫下或者直接進行分析。
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