你好,請問多糖純化用DEAE-52過柱子的話,怎麼判斷上量?
DEAE-52是一種陽離子交換樹脂,常用於多糖、蛋白質等生物大分子的純化。在使用DEAE-52過柱子進行多糖純化時,樣品的上柱量可以影響分離的效果和效率。
多糖的上柱量通常由以下幾個因素決定:
1.樹脂的交換容量:
這是指樹脂可以結合的離子數量,通常以當量/毫升樹脂(eq/mL)或微摩爾/毫升樹脂(µmol/mL)表示。DEAE-52的交換容量通常在1.3-1.5 meq/mL之間。
2.樣品的離子強度:
這是指樣品中可與樹脂交換的離子數量。對於多糖,這主要取決於它的電荷密度,即每個多糖分子上帶的負電荷數量。
3.樣品的體積:
根據樣品的濃度和體積,可以計算出樣品中多糖的總量。
爲了確定樣品的上柱量,需要知道上述所有資訊,並保證樣品中的多糖量不超過樹脂的交換容量。如果樣品的離子強度過高,可能需要稀釋樣品或使用更大量的樹脂。這些資訊只能作為一般的指導,實際的上柱量可能需要透過實驗最佳化來確定。例如,可以先使用一小部分樣品和樹脂進行試驗,觀察多糖的吸附和洗脫效果,然後根據結果調整樣品的上柱量。
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