請問多糖分子量測定必須要經過純化嗎?
DEAE-52(DEAE-Cellulose 52)是一種陽離子交換樹脂,常用於多糖、蛋白質等生物大分子的純化。在使用DEAE-52進行多糖純化時,需要考慮以下幾個因素來判斷樹脂用量:
1.樣品量:
首先,要評估所需純化的多糖樣品的總量。根據樣品量,可以估算所需的樹脂用量。一般來說,較大的樣品量可能需要更多的樹脂來保證足夠的結合位點。
2.樹脂容量:
DEAE-52樹脂的交換容量(即每克樹脂可結合的陽離子數量)是一個關鍵引數。不同生產廠家的DEAE-52樹脂交換容量可能有所不同,因此建議查閱產品說明書以獲取準確的交換容量資訊。根據交換容量和多糖樣品的總量,可以計算所需的樹脂用量。
3.結合效率:
多糖與DEAE-52樹脂的結合效率可能受到多糖的電荷密度、分子量、結構等因素的影響。因此,在實際操作中,可以先進行小規模的實驗來評估結合效率。根據實驗結果,可以適當調整樹脂用量。
4.柱子尺寸:
使用的柱子尺寸也會影響所需的樹脂用量。實驗中,要保證樹脂填充至適當的柱子高度。柱子的內徑和高度可以根據實驗需要進行選擇。
可以初步判斷DEAE-52樹脂的用量。在實際操作過程中,建議進行小規模的預實驗,以便最佳化操作條件和樹脂用量。
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