你好,我想問問那個關於人蔘總多糖含量的測定方法
人蔘總多糖含量的測定可以採用通常採用高效液相色譜法(HPLC)、近紅外光譜法和酚-硫酸法等。以高效液相色譜法測定人蔘總多糖含量為例,其操作步驟大致如下:
1.樣品準備:
將人蔘粉末與適量的提取液(如水或醇)混合,透過加熱提取、過濾和濃縮,得到人蔘提取物。
2.樣品處理:
將人蔘提取物過濾或離心,去除雜質和懸浮物,得到清澈的樣品溶液。
3.標準品製備:
選用適當的多糖(如葡萄糖、麥芽糖等)作為標準品,製備一系列不同濃度的標準溶液。
4.色譜柱選擇及條件設定:
根據實驗需求選擇合適的色譜柱(如葡聚糖凝膠色譜柱),並設定合適的HPLC操作條件,如流動相、流速、柱溫、檢測波長等。
5.樣品和標準品進樣:
將樣品和標準品溶液分別注入色譜柱。
6.分離和檢測:
在恆定的流速下,各成分在色譜柱中分離,並透過檢測器(如脫氫酶活性檢測器)檢測訊號。
7.繪製標準曲線:
以標準品濃度為橫座標,檢測訊號(如峰面積)為縱座標,繪製標準曲線。
8.計算多糖含量:
透過樣品的檢測訊號在標準曲線上找到對應的多糖含量,然後按照稀釋倍數和原始樣品質量計算人蔘總多糖含量。通常以每克人蔘中的多糖含量(如mg/g)表示。
HPLC具有高解析度、高靈敏度和準確性的特點,能夠有效分離複雜的混合物中的各種成分,包括不同型別的多糖,並在低濃度範圍內檢測多糖。此外,HPLC具有較好的可重複性,實驗結果具有較高的可靠性。HPLC可以同時進行定量和定性分析,有助於瞭解人蔘中不同型別多糖的含量和結構。與某些傳統方法相比,HPLC可以在較短的時間內完成分析。
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