您好，可以請問一下細胞代謝組學樣本提取前如何進行細胞數量歸一化和蛋白質濃度歸一化嗎？

歸一化是代謝組學研究中關鍵的預處理步驟，可以降低樣本間的差異，提高資料質量和可比性。細胞代謝組學樣本在提取前需要進行歸一化，以消除不同樣本間細胞數量和蛋白質濃度的差異，進行歸一化方法如下：




一、細胞數量歸一化：




1.細胞計數：

使用細胞計數器（例如，血細胞計數板或自動細胞計數器）確定每個樣本的細胞數量。在代謝組學分析前，確保每個樣本具有相同數量的細胞。




2.細胞裂解：

使用適當的細胞裂解方法（如超聲波、冷凍破碎等），確保每個樣本中的細胞完全破碎。在裂解過程中，新增相同體積的細胞裂解液，以確保提取的代謝物濃度相近。




二、蛋白質濃度歸一化：




1.蛋白質測定：

在細胞裂解後，使用蛋白質測定方法（如Bradford、Lowry或BCA等）測定每個樣本中的總蛋白質濃度。這有助於確保提取的代謝物濃度相近。




2.蛋白質濃度調整：

根據蛋白質測定結果，將所有樣本的蛋白質濃度調整到相同水平。這可以透過增加或減少相應的緩衝液來實現。在代謝物提取前，確保所有樣本具有相同的蛋白質濃度。




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