細菌發酵液經硫酸銨沉澱,過分子篩分離得到的一種蛋白,由於發酵液本身顏色較深,請問對N端測序有沒有影響?
對N端測序可能會受到細菌發酵液顏色深的影響。在蛋白質N端測序中,常使用Edman降解法進行測序,該方法是透過逐漸從N端氨基酸殘基開始,逐個去除氨基酸並進行鑑定。然而,當發酵液本身顏色較深時,可能會影響到N端測序的準確性和可靠性。
顏色深的發酵液可能含有一些色素或其他干擾物質,這些物質可能會影響到Edman降解試劑與目標蛋白質N端的反應,導致訊號強度減弱或反應不穩定。這可能會導致測序結果不清晰,甚至無法獲得可靠的N端序列資訊。
在這種情況下,爲了提高N端測序的準確性和成功率,可能需要採取一些改進措施,例如:
1.蛋白質純化:
對顏色深的發酵液中的蛋白質進行更徹底的純化,去除可能干擾測序的色素和其他雜質。
2.預處理:
對發酵液樣品進行預處理,例如透過特殊的過濾或柱層析等步驟,去除色素和干擾物質。
3.重複測序:
如果初次測序結果不理想,可以考慮多次重複測序,增加獲得可靠N端序列的成功率。
顏色深的細菌發酵液可能會對N端測序產生影響,因此在進行N端測序前,需要對樣品進行適當的處理和純化,以提高測序的準確性和可靠性。
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