蛋白質氨基酸序列的測定原理是什麼？

蛋白質氨基酸序列的測定原理涉及兩種主要方法：質譜法和DNA/RNA測序法。




一、質譜法測定蛋白質氨基酸序列的原理：




1.製備樣品：

將蛋白質進行消化，通常使用酶（如胰蛋白酶）將蛋白質分解為小肽段。




2.質譜分析：

將消化後的肽段透過質譜儀進行分析。質譜儀中，肽段會被離子化，形成帶電離子。然後，帶電離子會根據其質荷比（m/z）進行分離和檢測。




3.資料解析：

透過質譜儀獲得的資料，可以確定每個肽段的質量。由於質譜儀的精準度較高，可以推測出蛋白質的氨基酸序列。




二、DNA/RNA測序法測定蛋白質氨基酸序列的原理：




1.轉錄與逆轉錄：

將蛋白質編碼基因轉錄為RNA，然後透過逆轉錄反應將RNA轉化為互補的DNA（cDNA）。




2.PCR擴增：

使用聚合酶鏈反應（PCR）對cDNA進行擴增，產生許多複製品。




3.測序：

使用DNA測序技術對PCR擴增產物進行測序，從而確定原始蛋白質編碼基因的DNA序列。




4.翻譯：

將DNA序列翻譯成相應的蛋白質氨基酸序列。




這兩種方法的選擇取決於研究目的、樣本型別和實驗條件。質譜法適用於已經獲得純化的蛋白質樣品，而DNA/RNA測序法適用於從基因水平推斷蛋白質序列的情況。




百泰派克生物科技--生物製品表徵，多組學生物質譜檢測優質服務商




相關服務：

蛋白測序

多肽測序

抗體測序

單細胞測序

蛋白全序列測定

蛋白從頭測序