看蛋白修飾算CO-IP嗎?需要用triton100嗎?
CO-IP (Co-immunoprecipitation)是一種常用的蛋白質相互作用研究技術,透過特異性抗體識別目標蛋白並將其與相互作用蛋白共同沉澱下來,從而研究它們之間的相互作用關係。CO-IP並不是一種特定的蛋白修飾分析方法,而是一種用於分析蛋白質相互作用的實驗方法。
如果您想要分析特定蛋白修飾的水平,可以使用其他定量蛋白質組學技術,例如Western blot、MS等。當然,如果您已經使用CO-IP技術成功地免疫共沉澱了目標蛋白質和修飾酶等,可以將共沉澱物進行Western blot分析,以確定目標蛋白質的修飾水平。
一般情況下,CO-IP實驗需要使用一些輔助試劑來破壞細胞膜和胞核膜等細胞結構,以便充分釋放目標蛋白和相互作用蛋白。Triton X-100是一種非離子型表面活性劑,可以破壞細胞膜和胞核膜,有利於蛋白質的釋放。因此,在CO-IP實驗中,使用Triton X-100或其他表面活性劑的加入可以幫助釋放更多的目標蛋白和相互作用蛋白,提高實驗的靈敏度和特異性。
需要注意的是,Triton X-100或其他表面活性劑的加入可能會對某些蛋白質的性質產生影響,例如會導致一些蛋白質的凝聚或聚集,或者改變蛋白質的構象等。因此,在實驗設計和操作過程中需要考慮樣品的特性和目的,並根據需要進行最佳化和調整。
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