如何用maxquant解析蛋白質譜?
- 在“Global parameters”選項卡中,可以設定酶切酶(Enzyme)、酶切位點(Missed cleavages)和固定修飾(Fixed modifications)等基本引數。
- 點選“Group-specific parameters”選項卡,可以設定可變修飾(Variable modifications)、假陽性發現率(FDR)閾值和蛋白質定量方法(如標記與非標記定量)等。
- 在“Label-free quantification (LFQ)”選項卡中,可以設定與標籤自由定量相關的引數,如最小比值數(Min. ratio count)和最小有效值數(Min. valid values)等。
MaxQuant是一款廣泛使用的蛋白質質譜資料分析軟體,它可以處理自下而上策略(bottom-up)的蛋白質質譜資料,實現蛋白質鑑定和定量。以下是使用MaxQuant解析蛋白質質譜資料的基本步驟:
1.準備資料和軟體:
確保已安裝最新版本的MaxQuant軟體,下載地址為:https://www.maxquant.org/。同時,準備質譜原始資料檔案(通常為.raw格式)和蛋白質資料庫檔案(如FASTA格式)。
2.啟動MaxQuant:
執行MaxQuant軟體,開啟主介面。
3.匯入原始資料:
在主介面的左側,點選“Raw files”選項卡,然後點選“Browse”按鈕,選擇質譜原始資料檔案,或將檔案拖放到軟體介面中。
4.設定蛋白質資料庫:
點選“Global parameters”選項卡,在“Fasta file”一欄中,點選“Browse”按鈕,選擇FASTA格式的蛋白質資料庫檔案。
5.配置引數:
根據實驗需求和資料特點,設定MaxQuant的引數。以下是一些關鍵引數的說明:
6.開始分析:
引數設定完成後,點選主介面右下角的“Start”按鈕,啟動蛋白質質譜資料分析。分析過程可能需要較長時間,具體取決於資料量和計算機效能。
7.檢視結果:
分析完成後,MaxQuant會在輸出資料夾中生成多個結果檔案,如proteinGroups.txt(蛋白質組資訊)、peptides.txt(肽段資訊)和evidence.txt(單個肽段的證據資訊)等。這些檔案可以用Microsoft Excel或其他表格處理軟體開啟,檢視蛋白質鑑定和定量結果。
請注意,根據實驗需求和資料特點,可能需要調整MaxQuant的引數設定以獲得最佳結果。有關MaxQuant引數設定的詳細資訊和教程,可以參考MaxQuant官方文件和相關論文。
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