代謝組學FAQ彙總

• • 多肽合成—不同純度的合成肽所適用的研究分別是什麼？

  >75%，最好是>85%：免疫學應用、多克隆抗體生產和非靈敏篩選； >90%：SAR研究，生物測定； >95%：體外生物測定，如酶聯免疫吸附測定，酶學，生物活性； >98%：晶體學、核磁共振或敏感生物測定等結構研究。相關服務:多肽合成

• • 多肽合成—如何選擇以哪種形式合成多肽？

  常用的多肽合成形式有TFA鹽形式、乙酸鹽或鹽酸鹽形式。通常所有肽都以TFA鹽的形式合成。對於用於細胞測定或動物研究的多肽，應該考慮透過將其轉換為乙酸鹽或HCl鹽形式（TFA<1%保證）來去除TFA鹽，以避免異常反應。相關服務:多肽合成

• • 多肽合成—合成的多肽應選擇什麼型別的末端修飾？

  預設情況下，化學合成的肽在N端有遊離胺，在C端有遊離酸。N-端乙醯化和C-端醯胺化是不帶電的，這降低了肽的總電荷，因此溶解度可能降低。但是這樣的修飾也是有必要的，因為它模仿了肽的天然結構。此外，還增加了肽的代謝穩定性及其抵抗氨肽酶、外肽酶和合成酶酶降解的能力。透過增強它們進入細胞的能力從而提

• • 多肽合成—抗體生產的合適肽長度是多少？

  通常，推薦抗體多肽的長度為10-25個殘基。較長的肽可能具有更多的表位，但也更有可能形成非天然形式的穩定二級結構。肽長度太短（<10aa）通常也不好，除非有合理的原因，例如與相關家族成員或其他蛋白質的潛在序列同源。相關服務:多肽合成

• • 多肽合成—為什麼肽與載體蛋白的結合是必要的？

  因為大多數肽的分子量太小，無法在動物體內產生免疫反應。與載體蛋白如KLH、BSA或OVA的結合不僅會增加抗原的大小，還會增加其免疫原性。肽中需要半胱氨酸以實現高效結合。相關服務:多肽合成

• • 多肽合成—化學合成的多肽在冰箱裏能儲存多久？應該如何儲存？

  對於長期儲存，最好以固體形式儲存在<-15°C的冰箱中。如果在室溫下儲存，一些含有蛋氨酸或半胱氨酸的肽可能會開始降解。因此，我們建議您在收到包裹後儘快將它們存放在-20°C。 在-20°C或-80°C條件下，肽會在開始降解之前保持有效6個月或幾年。對於短期儲存，4 °C就足夠了。應保護肽免受

• • 多肽合成—肽儲存過程中會發生什麼？

  一些典型的降解反應或外消旋化可能包括 Met、Trp、Tyr 或 Cys 的氧化。Asn、Gln 和 C 末端醯胺可能發生脫醯胺作用。可能還會出現天冬醯胺、Asn-Pro分裂、N端Gln形成焦谷氨醯胺以及色氨酸和酪氨酸的二聚體等現象。相關服務:多肽合成

• • 多肽合成—肽溶於水嗎？

  常見的非極性、疏水性的氨基酸有：丙氨酸(A)、異亮氨酸(I)、纈氨酸(V)。含有50%及以上疏水或非極性殘基的多肽可能不溶於或僅部分溶於水溶液。在這種情況下，首先將疏水肽溶解在 50% (v/v) DMSO、DMF 或乙腈的小體積水中。 然後加入水或緩衝液至所需濃度。相關服務:多肽合成

• • 多肽合成—將合成肽保持在溶液中的最佳方法是什麼？

  溶解的肽比凍乾的乾粉更不穩定。 溶液應在冷凍前分裝，以避免解凍-再冷凍迴圈。由於可能的氧化作用，含有天冬氨酸、谷氨醯胺、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、酪氨酸的多肽可能不太穩定。儲存的溶液應放在乾燥的有機溶劑中，以避免過早水解。PH為5~7的緩衝液對成分的穩定性最好。帶細胞培養的多肽(>95%的高

• • 多肽合成—為什麼溶解的多肽會失去生物活性？如何防止多肽失去生物活性？

  蛋氨酸的氧化可能是多肽活性喪失的主要原因。亞碸的生成速率與序列有關。最好的方法是用其穩定的同工酶NLE取代蛋氨酸。含有硫基酪氨酸的多肽可能會因為脫硫而失去活性。相關服務:多肽合成