兔多抗用溴化氫瓊脂糖凝膠純化沒有成功是什麼原因?一般怎麼驗證抗原偶聯上了?

    使用溴化氫瓊脂糖凝膠純化兔多抗失敗可能有多方面的原因,比如:


    1.凝膠本身的問題

    凝膠的特性可能不適合所用的抗原或抗體,不同的凝膠有不同的孔隙大小和親和力特性,確保使用的瓊脂糖凝膠適合於你的實驗。


    2.偶聯效率低合

    如果抗原和載體(如瓊脂糖珠)的偶聯效率不高,可能導致目標抗體的親和力不足。


    3.洗脫條件

    洗脫條件(如pH、鹽濃度)可能不適宜,導致抗體不能有效從凝膠中洗脫出來。調整洗脫液的pH值或鹽濃度可能有所幫助。


    爲了驗證抗原是否成功偶聯到了抗體,可以採取以下方法:


    1.免疫印跡(Western Blot)

    使用已知的特異性抗體對偶聯產物進行Western Blot,觀察是否有特異性帶出現。


    2.ELISA(酶聯免疫吸附測定)

    用你的抗體包被微孔板,然後加入已知的抗原,檢測抗體是否能夠捕獲抗原。


    3.免疫熒光或免疫組化

    如果可能,使用免疫熒光或免疫組化檢查抗體是否能夠特異性結合到細胞或組織中的目標抗原。


    每種方法都有其優缺點,選擇哪種取決於你的具體需求和實驗條件。


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