WB條帶周圍一圈淺，中間黑是什麼原因

WB（Western Blot）條帶周圍淺色而中間較黑的現象通常是由於蛋白質過載或者檢測過敏所致。當樣品中蛋白質含量過高，超出了膜的結合能力或者檢測系統的線性範圍時，就可能出現中間較黑而邊緣較淺的條帶。這種情況下，中心部分的蛋白質過多，導致抗體飽和，而邊緣處蛋白質相對較少，抗體結合不飽和，因此顯色反應在中心更為顯著。




為避免這種情況，可以嘗試以下方法：




1.稀釋樣品：

減少載入的蛋白質量。




2.最佳化抗體濃度：

調整一抗和二抗的濃度，以避免過敏。




3.調整顯色時間：

減少顯色反應的時間，防止過度顯色。




確保樣品的蛋白質濃度適中且抗體濃度適當，可以提高WB實驗的準確性和重複性。




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