ip 實驗求助!input組目的蛋白為雙條帶,ip組拉下來是單條帶!
在免疫沉澱(Immunoprecipitation, IP)實驗中,如果在input(輸入)組中觀察到目標蛋白為雙條帶,而在IP組中只拉下單條帶,可能是由於:
1、蛋白修飾:
在Input組中,目的蛋白可能存在不同的翻譯後修飾形式(如磷酸化、糖基化等),導致電泳遷移速度不同,形成雙條帶。而在IP組中,可能只有一種形式的蛋白被特異性抗體識別並沉澱下來。
2、蛋白降解:
在Input組中,雙條帶可能是由於蛋白的部分降解。而在IP過程中,由於抗體的特異性結合,可能只拉下了未降解的完整蛋白,導致只出現單條帶。
3、實驗條件:
IP實驗條件(如洗滌、結合等步驟)可能導致某些形式的蛋白丟失。例如,較弱結合的蛋白在洗滌過程中可能被洗脫。
4、抗體特異性:
使用的抗體可能只與目的蛋白的某種特定形式結合,從而在IP組中只檢測到單條帶。
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