sumo融合蛋白為什麼在鎳柱上酶切切不掉標籤?
這種情況可能由幾個因素引起:
1.酶的活性不足:
使用的酶可能活性不高,或者已經失活。酶的活性可以受到多種因素影響,包括儲存條件、溫度、pH值等。建議檢查酶的質量和儲存條件,或者嘗試使用新鮮的酶。
2.酶的濃度不足:
可能酶的新增量不足,無法充分與蛋白接觸或者達到足夠的酶切效率。增加酶的濃度可能有助於改善切割效率。
3.不適宜的酶切條件:
酶的切割效率可能受到反應條件的影響,如pH值、鹽濃度、溫度等。需要最佳化這些條件以提高酶切效率。
4.緩衝液的選擇:
用於洗脫的緩衝液成分也可能影響酶的活性。例如,高濃度的親和層析柱洗脫劑(如亞甲基藍)可能抑制某些酶的活性。
如果遇到這種情況,建議分別針對上述可能的原因進行排查和調整。例如,可以透過更換新鮮酶、調整反應條件或改變洗脫策略等方式來嘗試解決問題。同時,也可以考慮在體外進行酶切而非在鎳柱上進行,以避免柱上可能的干擾因素。
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