質譜法測定氨基酸的原理?
質譜法測定氨基酸的原理基於測量氨基酸分子或其片段的質荷比(mass-to-charge ratio, m/z)。這個過程大致可以分為幾個步驟:
1.離子化:
氨基酸樣品首先被轉化為離子形式,以便在質譜中進行檢測。常用的離子化方法包括電噴霧離子化(Electrospray Ionization, ESI)和基質輔助鐳射解吸/電離(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization, MALDI)。
2.質量分析:
離子化後的氨基酸離子被送入質譜儀的質量分析器。在這裏,離子根據它們的質荷比(m/z)被分離。不同的質量分析器設計,比如四極杆、飛行時間(TOF)、離子阱等,有不同的分離機制。
3.檢測:
分離的離子隨後被檢測,質譜儀記錄下離子的強度(代表丰度)與其質荷比(m/z)。結果展現為一系列的峰,形成了所謂的質譜圖。
4.資料分析:
質譜圖中的每一個峰對應一種離子的m/z值,峰的高度或面積反映了該離子的相對丰度。透過與標準物質的質譜進行比較或利用資料庫,可以鑑定氨基酸的型別和量。
簡單來說,質譜法鑑定氨基酸的原理就是利用了不同氨基酸分子在離子化後根據其質荷比在電磁場中的行為差異,實現其分離和檢測。
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