SDS-PAGE檢測目的蛋白質,電泳結果如何?

    SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)是一種常用的蛋白質電泳技術。其基本原理是使用 SDS(十二烷基硫酸鈉)使蛋白質線性化並賦予負電荷,然後在聚丙烯醯胺凝膠中進行電泳。由於 SDS 的存在,蛋白質的遷移速度主要取決於其分子量,而與其原有的電荷和形狀無關。

     

    1.如何解讀 SDS-PAGE 電泳結果?

    SDS-PAGE 電泳後,你會得到一個帶有多條蛋白質帶的凝膠。每條帶代表一種蛋白質,帶的位置(即遷移距離)反映了蛋白質的分子量。帶的寬度和深度則反映了蛋白質的丰度。通常,分子量大的蛋白質遷移距離短,分子量小的蛋白質遷移距離長。透過與已知分子量的標準蛋白質進行比較,可以估計目的蛋白質的分子量。

     

    2.如何確定目的蛋白質?

    如果你知道目的蛋白質的預期分子量,你可以透過查詢與預期分子量相符的蛋白質帶來確定目的蛋白質。如果你有目的蛋白質的特異性抗體,你還可以進行免疫印跡(Western blot)分析來確證目的蛋白質的存在。

     

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