怎麼根據蛋白maker估算條帶中蛋白濃度為多少
根據SDS-PAGE中的蛋白質marker(也稱為蛋白分子量標準或樓梯)估算條帶中蛋白的濃度通常是透過比較條帶的顏色深淺(代表蛋白濃度)來完成的。但這隻能提供一個大致的估計值。其大致步驟如下:
1.執行SDS-PAGE:
使用已知濃度的蛋白marker和你的樣品一起執行SDS-PAGE。
2.染色:
通常使用如Coomassie Brilliant Blue或銀染色等染料對膠進行染色,然後去色以顯示蛋白條帶。
3.比較深淺:
觀察膠上的條帶。與marker相比,樣品中的蛋白條帶顏色越深,則蛋白濃度越高。
4.估算濃度:
如果你知道marker中各個條帶的蛋白濃度,你可以透過比較樣品條帶與與之最接近的marker條帶的顏色深淺來估算樣品的蛋白濃度。例如,如果一個marker條帶的濃度為50 μg,且其顏色深淺與你的樣品條帶相近,那麼你可以估計你的樣品條帶中的蛋白濃度也大約為50 μg。
5.定量化軟體:
有些研究者使用凝膠成像系統和定量化軟體來更準確地估算條帶的濃度。軟體可以透過分析條帶的顏色深淺來定量化蛋白的丰度,並與已知濃度的marker進行比較。
需要注意的是,這種方法只能提供蛋白濃度的大致估計。若要準確測量蛋白濃度,你可能需要使用其他方法,如Bradford蛋白測定、Lowry蛋白測定或BCA蛋白測定等。
百泰派克生物科技--生物製品表徵,多組學生物質譜檢測優質服務商
相關服務:
How to order?