蛋白質變性及其表徵
蛋白質變性是指蛋白質在生物體外或非生理環境下,其原有的三維結構(空間構象)發生不可逆的改變的過程。這通常涉及到蛋白質的二級、三級和四級結構的破壞,但一級結構(氨基酸序列)通常保持不變。蛋白質變性通常透過物理或化學途徑誘導,例如溫度升高、pH值的改變、機械振動、紫外照射、或是透過加入變性劑(例如尿素和硫酸銨)。
蛋白質變性的表徵:
蛋白質變性的過程通常可以透過多種技術和方法來表徵和檢測:
1.熒光光譜法:
原有蛋白質的熒光發生改變,通常是指色氨酸和苯丙氨酸殘基的內源性熒光。
2.圓二色譜法 (CD):
蛋白質的二級結構改變導致其CD譜發生變化。
3.核磁共振 (NMR) 和 X射線晶體學:
用於直接觀察蛋白質的空間結構和確定其在變性過程中的結構改變。
4.紅外光譜法 (FTIR):
透過測量蛋白質的振動模式來分析其二級結構的變化。
5.動態光散射 (DLS):
透過測量蛋白質溶液中的粒子大小和分佈來反映蛋白質聚集狀態的變化。
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