求問coip實驗後,利用sdspage實驗檢測兩個蛋白互作作用時出現的兩條帶是怎麼來的?
Co-IP(共免疫沉澱)實驗是用來檢測蛋白質-蛋白質相互作用的一種實驗方法。簡要地說,當研究者猜測兩種蛋白質可能存在相互作用時,可以使用一個蛋白質的抗體來捕獲該蛋白質以及與其結合的其他蛋白質。之後,透過SDS-PAGE (聚丙烯醯胺凝膠電泳) 對這些沉澱物進行分離並透過Western Blot進行分析。
當你在SDS-PAGE實驗後觀察到兩條帶,它們通常表示:
1.“Bait” 蛋白:
這是你用來進行免疫沉澱的蛋白,即你新增抗體以捕獲的那種蛋白。這通常是已知的,也是你想要探究與哪些其他蛋白質發生相互作用的蛋白。
2.“Prey” 蛋白:
如果你的“Bait”蛋白和另一種蛋白質存在相互作用,那麼這種蛋白也會被沉澱下來。這條帶表示與“Bait”蛋白質結合的“Prey”蛋白。
爲了確認這兩條帶確實是你感興趣的蛋白質,後續通常需要進行Western Blot分析,使用特異性抗體對這兩個蛋白質進行檢測。此外,還應該有適當的實驗對照,例如不新增抗體的對照或使用無關抗體的對照,以確保觀察到的帶是特異的。
百泰派克生物科技--生物製品表徵,多組學生物質譜檢測優質服務商
相關服務:
How to order?