17k的蛋白在western blot轉膜的時候電流和時間要多少?對pvdf膜有什麼要求?
Western blot轉膜時電流和時間的設定是根據所轉膜的蛋白的大小和性質來確定的。對於17kDa的蛋白來說,可以參考以下建議:
1.電流設定:
一般來說,較低的電流可以減少蛋白的熱失活和電泳緩衝液的蒸發。對於小分子量的蛋白,常見的電流設定為20-30 mA。
2.轉膜時間:
轉膜時間的設定也與蛋白的大小有關。對於17kDa的蛋白,通常轉膜時間為30-60min。
3.PVDF膜要求:
一般建議使用0.2或0.45微米的孔徑的PVDF膜。
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